CAS bilirubin u prahu 635-65-4se uglavnom ekstrahuje iz žuči. Bilirubin je nerastvorljiv u vodi, rastvorljiv u organskim rastvaračima kao što su benzen, hloroform i ugljični disulfid, a slabo rastvorljiv u etanolu i eteru. Bilirubin se također može otopiti u vrućoj mješavini etanola i hloroforma. Natrijumova so bilirubina je lako rastvorljiva u vodi, ali njene soli kalcijuma, magnezijuma i barijuma su nerastvorljive u vodi. Bilirubin je monoklinski kristal svijetlonarandžaste ili tamnocrvenkasto smeđe boje. Njegova suva čvrsta supstanca je relativno stabilna, a rastvor hloroforma je takođe relativno stabilan u mraku. Nestabilan je u alkalnom rastvoru (kao što je 0.1 mmol/L natrijum hidroksida) ili kada naiđe na jone trovalentnog gvožđa, i brzo se oksidira u biliverdin. Bilirubin se može vezati za glicin, alanin ili histidin. Dodavanje proteina u serumu, vitamina ili EDTA može stabilizirati bilirubin.
1. Priprema kalcijeve soli metodom indirektne ekstrakcije kalcijeve soli: dodati 3-3.5 puta zasićenog supernatanta krečne vode u svježu svinjsku žuč uz miješanje, a zatim nastaviti miješati 5-10min, Ph{ {4}}, ukloniti pjenu kada se zagrije na 50 stepeni gazom, nastaviti zagrijavati do ključanja, držati 2 min, ohladiti, filtrirati i dobiti kalcijumovu so. Priprema gotovog proizvoda bilirubina: Uzmite kalcijumovu so i dodajte 0.8 puta veću količinu vode da dobijete pastu, procedite kroz 30-40 mrežicu, dodajte 0,3% antioksidansa u filtrat, dodajte so i kiselinu da podesite pH na 1,5, ostavite da odstoji 4 sata, filtrirajte, dodajte 8-10 puta količinu 80% etanola u filter kolač, izgnječite i dobro promiješajte, dodajte antioksidans, ostavite da odstoji preko noći i dobijete precipitat. Dodajte 4-6 puta više od 80% ili više etanola i antioksidansa, promiješajte i potopite preko noći. Ponovite ovaj proces 3-4 puta i osušite talog ispod 70 stepeni da dobijete gotov bilirubin proizvod.
Precipitacija kalcijeve soli [HCl, teški natrijum-sulfit] → precipitacija [etanol, teški natrijum-sulfit] → precipitacija [70 stepeni ] → bilirubin proizvod.
2.Priprema kalcijum bilirubinata metodom ekstrakcije hloroformom: Sveža svinjska žuč se podesi na pH 12 sa natrijum hidroksidom, zagreje do ključanja, doda se rastvor kalcijum hlorida, zatim zagreje do ključanja, ohladi, filtrira da se dobije kalcijum bilirubinat. Svinjska žuč [NaOH, CaCl2] → [pH 12, 100 stepeni ] Priprema praha bilirubina CAS 635-65-4 kalcijumova so bilirubin gotov proizvod: bilirubin kalcijeva so se podešava na pH 1-2 sa 1:1 hlorovodoničnom kiselinom, kisela voda se ocijedi, hloroform se ekstrahuje hloroformom, ispere bezvodnim etanola, a rastvor se ostavi na oko 5 stepeni da bi se dobio gotov proizvod bilirubina.
Bilirubin kalcijeva so [HCl] → [pH1-2] kiselo jedinjenje [hloroform, bezvodni etanol] → [5 stepeni ] bilirubin gotov proizvod
3. Poboljšana metoda kalcijeve soli za zakiseljavanje soli kalcijuma: Uzmite svježu svinjsku žuč i dodajte 1% kalcijum hidroksida, dobro promiješajte, brzo zagrijte na 90-97 stepen, držite na toplom 10 minuta i filtrirajte da dobijete kalcijumove soli. Zagrijavanje na 40 stepena će uzrokovati pojavu masnoće koja se može lagano ukloniti. Dobivena kalcijeva sol se može jednom isprati vrućom vodom kako bi se uklonio višak lužine i drugih nečistoća. Uzmite kalcijumovu sol i dodajte više od 10 puta veću količinu vode da biste je ravnomjerno raspršili. Dodajte 1% antioksidansa i promiješajte (60 o/min) da se kap po kap doda 1:2 hlorovodonična kiselina. Unutar 40 minuta dostignite pH 2,0 i pričekajte da pH ostane nepromijenjen da dobijete kiselu supstancu. Svinjska žuč [1% kalcijum hidroksida] → [90-97 stepen , 15 min] Kalcijumova so žuči [antioksidans, hlorovodonična kiselina] → [pH2,40min] Ispiranje alkoholom kiselom kiselinom, pranje vodom: Zakiseljeni bilirubin se ravnomerno raspršuje na sobnoj temperaturi sa 10 puta većom količinom etanola, pH ne bi trebao biti veći od 5, doda se 0,5% antioksidansa, promiješa se i ostavi oko 1 sat za nanošenje slojeva. Idite na gornji sloj otopine alkohola i sakupite precipitirani bilirubin. Isperite bilirubin toplom vodom na 50 stepeni oko 5 minuta, sakupite plutajući bilirubin, brzo dodajte etanol za dehidraciju i uklonite etanol da biste dobili sirovi bilirubin. Kiselo jedinjenje [etanol] → [1h] talog bilirubina [50 stepeni vruće vode] → [etanol] ekstrakcija sirovog bilirubina, isparavanje, kristalizacija i sušenje: Uzmite sirovi bilirubin i dodajte 10 puta hloroform da se mućka na 50 stepeni 10 minuta. Ako je potrebno, ekstrahirajte 2-3 puta, a ostatak bi trebao biti bijeli. Ekstrakt hloroforma je podvrgnut vakuum destilaciji do skoro sušenja, što je rezultiralo formiranjem većine kristala bilirubina. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, dodat je etanol i dalje hlađen na 4 stepena 10 minuta. Kristali bilirubina su filtrirani i tretirani bezvodnim etanolom ili etrom, nakon čega je uslijedilo sušenje u vakuumu kako bi se dobio bilirubin visokog kvaliteta.
Sirovi bilirubin [hloroform] → [10 min] rastvor hloroforma [kristalizacija] → visokokvalitetni bilirubin
4. Priprema rastvora za hidrolizu metodom ekstrakcije jonoizmenjivačke smole: Uzmite svežu kravlju žuč, filtrirajte je gazom, dodajte 2mol/L rastvora natrijum hidroksida da se pH podesi na 10 uz mešanje, prokuvajte i filtrirajte da biste dobili hidrolizat.
Adsorpcija i eluiranje žučne kiseline kolonom smole za hidrolizu: Prokuhanu otopinu za hidrolizu sipajte u prethodno zagrijanu kolonu smole dok boja efluenta ne postane tamnija i adsorpcija ne postane zasićena.
Dodajte hladnu vodu dok temperatura unutar kolone ne padne na sobnu temperaturu, a zatim dodajte razrijeđenu otopinu natrijum bisulfit hidrohlorida sa vrha kolone da postignete pH efluenta 1.
Isperite sa 75% etanolom, sakupite kada eluent postane tamnozelena mutna otopina i isperite dok efluent ne postane bistar i pH je blizu neutralnog. Ponovo isperite sa 95% etanolom.
Sakupiti otopinu za eluiranje etanola za pripremu žučne kiseline. Rastvor za hidrolizu [kolona za ionsku izmjenu] → [75% etanol, 95% etanol] Etanolni eluent za eluiranje bilirubina, koncentriranje i sušenje: Otpustite sav 95% etanol iz kolone, potopite u hloroform 10 minuta i sakupite eluent za hloroform dok ne pojavljuje se žuta boja.
Oddestilirajte eluent za hloroform do skoro suva, dodajte bezvodni etanol i nastavite sa obnavljanjem sve dok ne bude kloroforma. Filtrirajte dok je vruće, sakupite bilirubin, osušite i dobijete gotov proizvod bilirubina.
Yolanda
Mobilni: +86 -29-86107037-8012
Email:sales9@konochemical.com
Tel/Wechat : 18729555803